第一单元第二章第三节观察大肠杆菌和酵母菌孙艳波

山东省实验中学

实验教学

第一单元第二章第三节

观察大肠杆菌和酵母菌

山东省实验中学孙艳波

目的要求：

1.通过观察大肠杆菌，了解原核细胞的结构特征。

2.通过对酵母菌的观察，认识真核细胞的结构特点。

实验原理：

大肠杆菌和酵母菌是自然界中常见的两类单细胞生物，分别属于原核生物和真核生物。草酸铵结晶紫染液是碱性染料，能将细胞核染色。

材料器具：

大肠杆菌、酵母菌菌种；草酸铵结晶紫染液、碘液、液体石蜡、无菌水；显微镜、载玻片、酒精灯、盖玻片、吸水纸、接种环。

活动程序：

[实验一]大肠杆菌涂片制作及观察

（1）涂片：取洁净的载玻片一张，在中央滴一小滴无菌水，用接种环从菌面上挑取少量菌体与水混合。再用接种环将菌体涂成均匀薄层（直径约一厘米）。

（2）干燥：涂片后，待其自然干燥。

（3）固定：将已干燥的涂片标本向上，在微火上通过3至4次，进行固定。不能在火焰上烤否则细菌形态将被破坏。

（4）染色：在涂菌处滴加草酸铵结晶紫1至2滴，染色1分钟。

（5）冲洗：斜置载玻片，弃去染液，用水轻轻冲去染液至流水变清。

（6）吸干：用吸水纸轻轻吸去载玻片上的水分，干燥。

（7）镜检：将染色的标本置于显微镜下，先用低倍镜找到目标，再用高倍镜观察。

[实验二]酵母菌临时装片的制作及观察

（1）制片：在载玻片中央滴一滴酵母菌培养液，盖上盖玻片。

（2）染色：在盖玻片一侧滴一滴碘液，再另一侧用吸水纸吸引，将酵母菌细胞核染色。

（3）观察：将染色的标本置于显微镜下，先用低倍镜找到目的细胞，再用高倍镜进行观察。

小组进行总结、讨论，得出结论：

大肠杆菌在显微镜下呈现杆状，他的结构主要包括细胞壁、细胞膜、细胞质，无成形的细胞核；酵母菌呈现球状、卵圆状或椭圆状等，结构主要包括细胞壁、细胞膜、细胞质，有成形的细胞核。

课后记：

1.对于这个实验的原理，很多学生不能理解，课本上也没有详细的解释。草酸铵结晶紫是碱性染料（醋酸洋红、甲基绿-派洛宁、龙胆紫染液都是），可将细胞核或者拟核中的DNA染成深色。

碘液与蛋白质反应出现黄褐色，酵母菌的细胞质中含有大量的蛋白质，所以我们从图片中可以看出，酵母菌，除了细胞核之外，都是黄褐色。

2.草酸铵结晶紫染液是碱性染料，能将细胞核染色。

在实验原理中的这句话，说得不明确，恰好学生正在学习原核生物和真核生物的区别，对于大肠杆菌也被冠以“细胞核”的说法非常不认同，建议老师在讲课的过程中更正为“拟核区的大型DNA”,酵母菌的实验中可以说细胞核，但是碘液也不是对细胞核进行染色。

3.关于“固定”这一步的目的：是使细胞质凝固，以固定细菌的形态，并使其不易脱落。

4.这个实验，出现得比较早，学生还没有培养大肠杆菌和酵母菌的基础，也不知道接种和挑取菌种的方法，所以很多老师不讲或者不做这个实验，但是不管课标上是否要求，这个实验做起来还是很生动的，也可以在选修一实验中加上这一节课的内容，使前面的知识在后面的学习中得以应用。

必修一

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